+7 (800) 700-19-29 Звонок по России бесплатный Пн-Вск 8:00-21:00 по Москве
+7 (800) 700-19-29

Вопросы · Ситуационные задачи · Тренировка

Фармацевтическая химия и фармакогнозия - кейс 33

Прочитайте условие и отметьте все подходящие варианты в каждом вопросе.

Условие задачи

УСЛОВИЕ СИТУАЦИОННОЙ ЗАДАЧИ

Ситуация

В аналитическую лабораторию отдела контроля качества (ОКК) биотехнологического предприятия поступила субстанция амилазы. Образец был подвергнут всем необходимым видам контроля.

Вопросы по задаче

Вариатив

При выполнении анализа SDS-PAGE в восстанавливающих условиях разрушается +____________+ структура белка

Отметьте все подходящие варианты.

Показать правильный ответ

Правильный ответ:

  • трёхмерная

Обоснование

ОФС.1.2.1.0023.15 Электрофорез в полиакриламидном геле «Трехмерная структура белков часто поддерживается за счет дисульфидных связей. Цель анализа SDS-ПААГ в восстанавливающих условиях состоит в том, чтобы разрушить эту структуру путем расщепления дисульфидных связей.»

План экспертизы (исследования)

Метод диск-электрофореза, благодаря своей высокой разрешающей способности, рекомендуется для характеристики

Отметьте все подходящие варианты.

Показать правильный ответ

Правильный ответ:

  • смесей белков и для обнаружения примесей, которые могут иметь подвижность, близкую к подвижности главного компонента

Обоснование

ОФС.1.2.1.0023.15 Электрофорез в полиакриламидном геле «Метод диск-электрофореза, благодаря своей высокой разрешающей способности, рекомендуется для характеристики смесей белков и для обнаружения примесей, которые могут иметь подвижность, близкую к подвижности главного компонента.»

План экспертизы (исследования)

Движущей силой процесса разделения молекул методом электрофореза в полиакриламидном геле является

Отметьте все подходящие варианты.

Показать правильный ответ

Правильный ответ:

  • электрическое поле

Обоснование

ОФС.1.2.1.0023.15 Электрофорез в полиакриламидном геле «Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод молекулярной биологии и биохимии – электрофорез в полиакриламидном геле (ПААГ), используемый для разделения белков и нуклеиновых кислот, который основан на движении заряженных биологических макромолекул в постоянном электрическом поле.»

План экспертизы (исследования)

Для наблюдения за ходом электрофореза в исходный препарат добавляют краситель, молекулы которого несут электрический заряд +_________________________________________________+ , но +__________________________________+ , причем скорость миграции наиболее подвижных макромолекул пробы должна быть +______________+ , чем у молекул красителя»

Отметьте все подходящие варианты.

Показать правильный ответ

Правильный ответ:

  • того же знака, что и фракционируемые молекулы ; не взаимодействуют с ними ; несколько ниже

Обоснование

«Для наблюдения за процессом в исходный препарат добавляют краситель, молекулы которого несут электрический заряд того же знака, что и фракционируемые молекулы, но не взаимодействуют с ними, причем скорость миграции наиболее подвижных макромолекул пробы должна быть несколько ниже, чем у молекул красителя.»

План экспертизы (исследования)

В некоторых случаях пробы перед проведением SDS-PAGE электрофореза подвергают дополнительной температурной обработке для

Отметьте все подходящие варианты.

Показать правильный ответ

Правильный ответ:

  • обеспечения полной денатурации

Обоснование

ОФС.1.2.1.0023.15 Электрофорез в полиакриламидном геле «Обычно для обеспечения полной денатурации образец в смеси с буферным раствором подвергают дополнительно температурной обработке, режим которой должен быть указан в фармакопейной статье или нормативной документации.»

План экспертизы (исследования)

Анализ методом SDS-PAGE останавливают, когда индикатор-краситель

Отметьте все подходящие варианты.

Показать правильный ответ

Правильный ответ:

  • достигает нижнего края геля

Обоснование

ОФС.1.2.1.0023.15 Электрофорез в полиакриламидном геле «Когда индикатор достигает основания геля, электрофорез останавливают»

План экспертизы (исследования)

С анализируемым белком связываются _____ антитела

Отметьте все подходящие варианты.

Показать правильный ответ

Правильный ответ:

  • первые

Обоснование

ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот «Детекцию проводят с помощью специфичных к определяемому белку антител, конъюгированных с щелочной фосфатазой или пероксидазой хрена (прямой вариант ИФА), или последовательно с помощью первых антител к определяемому белку, и вторых антител (так называемой, антиглобулиновой сыворотки), специфичных к иммуноглобулину первых антител, конъюгированных с щелочной фосфатазой или пероксидазой хрена (непрямой вариант ИФА).»

План экспертизы (исследования)

В методе вестерн-блот в качестве первых антител использовались антитела, полученные от мышей. В качестве вторых могут быть использованы

Отметьте все подходящие варианты.

Показать правильный ответ

Правильный ответ:

  • поликлональные анти-мышиные антитела

Обоснование

ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот (ГФ XIV) «В качестве вторых антител используют поликлональные антитела к иммуноглобулинам того вида животного, которое использовалось для получения первых антител.»

План экспертизы (исследования)

PVDF-мембрану перед проведением переноса подготавливают, выдерживая

Отметьте все подходящие варианты.

Показать правильный ответ

Правильный ответ:

  • в спиртовом растворе 10-15 минут, 5 минут в деионизированной воде, а затем 5 минут в буфере для переноса

Обоснование

ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот «При использовании PVDF-мембраны ее необходимо выдержать в растворе метанола или спирта в течение 10-15 мин, а затем произвести аналогичные действия, что и для нитроцеллюлозной мембраны.»

План экспертизы (исследования)

Раствор тетраметилбензидинового субстрата (TMB) при проведении анализа методом вестерн-блот используют для

Отметьте все подходящие варианты.

Показать правильный ответ

Правильный ответ:

  • проявление картины иммуноблота

Обоснование

ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот «Проявление картины иммуноблота на мембране проводят раствором тетраметилбензидинового субстрата (ТМВ) для антител, конъюгированных с пероксидазой хрена, или раствором для проявления щелочной фосфатазы – при использовании антител, конъюгированных со щелочной фосфатазой (если нет иных указаний в фармакопейной статье или нормативной документации).»

План экспертизы (исследования)

С геля на мембрану на втором этапе анализа вестерн-блот переносится(ятся)

Отметьте все подходящие варианты.

Показать правильный ответ

Правильный ответ:

  • белки

Обоснование

ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот «Для проведения переноса белков используют прибор для переноса белков. Все работы проводят в резиновых перчатках. Объем всех используемых растворов должен быть достаточен для полного погружения мембраны, на которую переносят белки.»

План экспертизы (исследования)

«Сэндвич» для переноса при выполнении анализа методом вестерн-блот собирают таким образом, чтобы мембрана

Отметьте все подходящие варианты.

Показать правильный ответ

Правильный ответ:

  • была обращена к аноду

Обоснование

ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот «На мембрану помещают от одного до трех листов фильтровальной бумаги, предварительно смоченных в растворе для переноса белков, и сверху прикрывают второй специальной губкой, смоченной в растворе для переноса белков. Рамку скрепляют зажимами и медленно погружают в прибор для электрофореза, заполненный раствором для переноса белков, лист мембраны должен быть обращен к аноду.»

Тренажёр для самостоятельной подготовки. Прохождение тестов не заменяет официальную аккредитацию и не начисляет ЗЕТ НМО.

Оставьте Ваш номер для консультации